परिचय

ऑप्टिक तंत्रिका की चोट या ग्लूकोमा के कारण दृष्टि हानि इसलिए होती है क्योंकि रेटिनल गैन्ग्लियन कोशिकाएं (RGCs) अपने एक्सॉन को फिर से विकसित करने में विफल रहती हैं। वयस्क स्तनधारियों में, RGCs का आंतरिक विकास कार्यक्रम सामान्य रूप से बंद रहता है, इसलिए क्षतिग्रस्त नसें अपने आप ठीक नहीं होती हैं (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। हाल के चूहे के अध्ययनों से पता चलता है कि जीन थेरेपी इन विकास मार्गों को पुनः सक्रिय कर सकती है। उदाहरण के लिए, वयस्क RGCs में PTEN जीन (कोशिका वृद्धि पर एक ब्रेक) को हटाने से mTOR वृद्धि मार्ग सक्रिय हो जाता है और एक्सॉन का मजबूत पुनर्जनन होता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। इस लेख में हम समीक्षा करेंगे कि PTEN/mTOR, KLF-परिवार के जीनों और Sox11 में हेरफेर कैसे RGC एक्सॉन पुनर्जनन को उत्तेजित कर सकता है, चूहों में इसने क्या हासिल किया है, सुरक्षा के मुद्दे (जैसे कैंसर का खतरा), जीन कैसे वितरित किए जाते हैं (AAV वायरल वेक्टर, इंट्राविट्रियल या सुप्राकोरोइडल इंजेक्शन), और तीव्र चोट के मॉडल से क्रोनिक ग्लूकोमा उपचार की ओर बढ़ने के लिए किन कदमों की आवश्यकता है।

RGCs में आंतरिक विकास मार्ग

PTEN/mTOR मार्ग

सामान्य परिस्थितियों में, वयस्क RGCs mTOR मार्ग को काफी हद तक निष्क्रिय रखते हैं, जो नए एक्सॉन विकसित करने की उनकी क्षमता को सीमित करता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। PTEN एक जीन है जो mTOR को रोकता है। वैज्ञानिकों ने पाया कि वयस्क चूहे के RGCs में PTEN को हटाने से mTOR सिग्नलिंग मुक्त हो जाती है और एक्सॉन का पुनर्जनन होता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। एक महत्वपूर्ण अध्ययन में, वयस्क चूहों में PTEN के कंडीशनल नॉकआउट से मजबूत ऑप्टिक तंत्रिका पुनर्जनन हुआ (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। लगभग 8-10% जीवित RGCs ने चोट के 0.5 मिमी से अधिक आगे एक्सॉन फैलाए, कुछ एक्सॉन 3 मिमी से आगे बढ़े और चोट के 4 सप्ताह बाद ऑप्टिक चियाज़्म तक भी पहुँच गए (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। mTOR पर एक और ब्रेक, TSC1 जीन को नॉकआउट करने से भी एक्सॉन का पुनर्जनन प्रेरित हुआ (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)।

PTEN को हटाने से न केवल पुनर्जनन को बढ़ावा मिला बल्कि RGC के जीवित रहने में भी सुधार हुआ (नियंत्रण में ~20% बनाम लगभग 45% जीवित बचे) (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। हालांकि, एक सुरक्षा चिंता है: PTEN एक ट्यूमर सप्रेसर है। PTEN का दीर्घकालिक नुकसान अनियंत्रित कोशिका वृद्धि को बढ़ावा दे सकता है। दरअसल, एक प्रमुख पुनर्जनन अध्ययन में बताया गया है कि कैंसर के जोखिम के कारण PTEN को स्थायी रूप से हटाना चिकित्सकीय रूप से अस्वीकार्य होगा (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। इस समस्या को हल करने के लिए, शोधकर्ता नियंत्रणीय जीन थेरेपी (उदाहरण के लिए, एक स्विच करने योग्य प्रमोटर के तहत AAV-वितरित shRNA) का उपयोग करने का सुझाव देते हैं ताकि PTEN गतिविधि को पुनर्जनन के दौरान बंद किया जा सके और फिर से चालू किया जा सके (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। संक्षेप में, PTEN/mTOR एक शक्तिशाली आंतरिक विकास स्विच है, लेकिन इसे सावधानीपूर्वक नियंत्रित किया जाना चाहिए।

KLF परिवार और Sox11

शोधकर्ताओं ने ट्रांसक्रिप्शन फैक्टरों को भी लक्षित किया है जो एक्सॉन के विकास को नियंत्रित करते हैं। क्रुपेल-जैसे कारक (KLFs) ऐसे जीनों का एक परिवार हैं। एक प्रमुख खोज यह है कि KLF4 एक्सॉन के विकास पर एक ब्रेक के रूप में कार्य करता है: KLF4 की कमी वाले RGCs सामान्य से बेहतर बढ़ते हैं (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। ऐसे चूहों में जिन्हें इंजीनियर किया गया था ताकि RGCs में कोई KLF4 न हो, इन न्यूरॉन्स ने कल्चर में बहुत लंबे न्यूराइट्स फैलाए और, ऑप्टिक तंत्रिका क्रश के बाद, कई और एक्सॉन बाहर निकल आए। उदाहरण के लिए, चोट के दो सप्ताह बाद, KLF4-नॉकआउट चूहों में क्रश साइट से 1 मिमी से अधिक दूर महत्वपूर्ण रूप से अधिक पुनर्जीवित फाइबर थे, जंगली-प्रकार के चूहों की तुलना में (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। अन्य KLFs की भूमिकाएँ अलग-अलग होती हैं: कुछ (जैसे KLF6 और KLF7) विकास को बढ़ावा देते हैं, जबकि अन्य (जैसे KLF9) इसे दबाते हैं (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। इस प्रकार, KLF अभिव्यक्ति को फिर से संतुलित करने से RGC वृद्धि पर कुछ विकासात्मक “ब्रेक” हटाए जा सकते हैं (pmc.ncbi.nlm.nih.gov) (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)।

एक और ट्रांसक्रिप्शन फैक्टर Sox11 है, जो विकास में महत्वपूर्ण है। वयस्क RGCs में Sox11 को अति-अभिव्यक्त करने से (AAV जीन डिलीवरी का उपयोग करके) भी पुनर्जनन को बढ़ावा मिला। एक अध्ययन में, अतिरिक्त Sox11 वाले RGCs ने चोट के बाद एक्सॉन के पुनर्जनन में उल्लेखनीय वृद्धि दिखाई (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। हालांकि, Sox11 के मिश्रित प्रभाव होते हैं: यह कुछ RGC प्रकारों में पुनर्जनन को बढ़ावा देता है लेकिन दूसरों को मार सकता है। विशेष रूप से, Sox11 के अति-अभिव्यक्ति ने लगभग सभी तथाकथित “अल्फा” RGCs (RGC का एक उपप्रकार) को मार दिया जो आमतौर पर PTEN-आधारित उपचारों के प्रति अच्छी प्रतिक्रिया देते हैं (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। दूसरे शब्दों में, Sox11 कुछ RGCs को वृद्धि-सक्षम अवस्था में पुनः प्रोग्राम करता है, लेकिन यह दूसरों को भी नुकसान पहुँचाता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। वैज्ञानिकों का निष्कर्ष है कि विभिन्न RGC उपप्रकारों को अलग-अलग पुनर्जनन रणनीतियों की आवश्यकता होती है।

प्रमुख चूहे ऑप्टिक तंत्रिका क्रश अध्ययन

ऑप्टिक तंत्रिका चोट (ऑप्टिक तंत्रिका क्रश) के चूहे के मॉडल ने दिखाया है कि ये जीन हेरफेर व्यवहार में कैसे काम करते हैं। एक शास्त्रीय दृष्टिकोण ने अधिकतम प्रभाव के लिए मार्गों को संयोजित किया। एक PNAS अध्ययन में, वैज्ञानिकों ने तीन उपचार लागू किए: PTEN को हटाना, आंख में सूजन प्रेरित करना (ज़ाइमोसन), और cAMP को बढ़ाना। इस तिकड़ी ने RGCs को एक्सॉन को ऑप्टिक तंत्रिका से होते हुए और मस्तिष्क के दृश्य केंद्रों तक फिर से विकसित करने के लिए प्रेरित किया (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। जब उन्होंने उपचारित चूहों के मस्तिष्क की जांच की, तो कई पुनर्जीवित फाइबर पार्श्व जेनिकुलेट न्यूक्लियस, सुपीरियर कोलिकुलस और अन्य दृश्य क्षेत्रों तक पहुँच गए (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। महत्वपूर्ण रूप से, इस पुनर्जनन से दृष्टि-संबंधित व्यवहारों की आंशिक वसूली हुई। उपचारित चूहों ने सरल दृश्य कार्यों को करने की कुछ क्षमता फिर से प्राप्त कर ली: वे चलती हुई पैटर्नों को ट्रैक कर सकते थे (एक ऑप्टोमोटर रिफ्लेक्स) और घायल नियंत्रणों की तुलना में गहराई को बेहतर ढंग से आंक सकते थे (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। (उन्होंने बेहतर सर्कैडियन प्रकाश प्रतिक्रियाएँ भी दिखाईं [20†L33-L38], हालांकि उन विवरणों को मापना मुश्किल हो सकता है।) इस कार्य ने प्रदर्शित किया कि वयस्क चूहों में लंबी दूरी के एक्सॉन पुनर्जनन से दृश्य प्रणाली के कुछ हिस्सों को कार्यात्मक रूप से फिर से जोड़ा जा सकता है।

अन्य अध्ययनों ने व्यक्तिगत कारकों पर ध्यान केंद्रित किया। इंट्राविट्रियल रूप से संविधानिक रूप से सक्रिय TrkB (एक मस्तिष्क-व्युत्पन्न न्यूरोट्रॉफिक कारक रिसेप्टर) ले जाने वाले AAV को वितरित करने से और भी अधिक वृद्धि हुई। उदाहरण के लिए, निशिजिमा एट अल. ने AAV द्वारा वितरित एक इंजीनियर TrkB (जिसे F-iTrkB कहा जाता है) का उपयोग किया और देखा कि एक्सॉन 4.5 मिमी से अधिक फिर से विकसित हुए, कुछ ऑप्टिक चियाज़्म तक पहुँच गए (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। इसी तरह, सक्रिय K-Ras (एक प्रसिद्ध ऑन्कोजीन) जैसे वृद्धि-प्रमोटिंग जीन को RGCs में डालने से लगभग 3 मिमी का पुनर्जनन हुआ (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। दिलचस्प बात यह है कि उपचारित आंखों में कोई ट्यूमर नहीं देखा गया, लेकिन लेखक अभी भी सुरक्षा के लिए इंड्यूसिबल ऑन/ऑफ जीन स्विच का उपयोग करने की सलाह देते हैं (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। ये और अन्य अध्ययन पुष्टि करते हैं कि आंतरिक विकास जीनों को चालू करने से वास्तव में चूहे के ऑप्टिक तंत्रिका चोट मॉडल में पुनर्जनन को बढ़ावा मिल सकता है।

आंशिक दृश्य पुनर्प्राप्ति

चूहे के प्रयोगों ने अक्सर न केवल शरीर रचना बल्कि कार्य को भी ट्रैक किया। ऑप्टोमोटर रिफ्लेक्स (चूहों द्वारा चलती पट्टियों का पालन करना) और गहराई धारणा परीक्षण यह देखने के सरल तरीके हैं कि क्या दृष्टि में सुधार होता है। ट्रिपल-ट्रीटमेंट अध्ययन में (pmc.ncbi.nlm.nih.gov), चूहों ने इन रिफ्लेक्सिस की आंशिक बहाली दिखाई। वे एक बार फिर से चलती दृश्यों पर प्रतिक्रिया दे सकते थे और गहराई का न्याय कर सकते थे, जबकि बिना उपचार के घायल चूहे ऐसा नहीं कर सकते थे (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। यह उत्साहजनक है: इसका मतलब है कि पुनर्जीवित एक्सॉन ने उपयोगी संबंध बनाए। हालांकि, वसूली केवल आंशिक थी। कई दृश्य मार्ग (विशेष रूप से महीन छवि-निर्माण दृष्टि) अभी भी डिस्कनेक्टेड रहते हैं। अब तक, पुनर्जनन ने बुनियादी दृश्य प्रतिक्रियाओं को बहाल किया है, लेकिन पूर्ण दृष्टि को नहीं। फिर भी, किसी भी कार्यात्मक लाभ को देखना इन रणनीतियों की क्षमता की पुष्टि करता है।

सुरक्षा संबंधी विचार

जबकि पुनर्जनन के लिए जीन थेरेपी आशाजनक है, सुरक्षा एक महत्वपूर्ण चिंता का विषय है। वही विकास मार्ग जो एक्सॉन की मदद करते हैं, यदि अनियंत्रित छोड़ दिए जाएं तो समस्याएं भी पैदा कर सकते हैं। जैसा कि उल्लेख किया गया है, PTEN को स्थायी रूप से हटाना कैंसर का जोखिम है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। इसी तरह, mTOR को लगातार सक्रिय करने से ट्यूमर का विकास हो सकता है (उदाहरण के लिए, TSC1/2 रोगियों को ट्यूमर हो जाते हैं)। वृद्धि कारकों (जैसे इंजीनियर RAS या अन्य ऑन्कोजीन) को बढ़ावा देने वाली जीन थेरेपी को सावधानीपूर्वक नियंत्रित किया जाना चाहिए। विशेष रूप से, प्रायोगिक AAV-RAS थेरेपी में चूहे की आंखों में कोई ट्यूमर नहीं देखा गया (pmc.ncbi.nlm.nih.gov), लेकिन लेखकों ने इस बात पर जोर दिया कि यदि किसी ऑन्कोजेनिक गतिविधि को बंद करने की आवश्यकता हो तो विनियमित (प्रेरित) प्रणालियों का उपयोग किया जाना चाहिए (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)।

अन्य सुरक्षा मुद्दों में कोशिका मृत्यु और प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं शामिल हैं। कुछ हस्तक्षेप कुछ कोशिकाओं को नुकसान पहुँचाते हैं: उदाहरण के लिए, Sox11 के अति-अभिव्यक्ति ने कई अल्फा-प्रकार के RGCs को मार दिया (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। कोई भी थेरेपी जो RGCs को मारती है, उसके लाभ को बेअसर कर देती है। इंजेक्शन या सूजन से होने वाले नुकसान का भी खतरा है। सूजन (ज़ाइमोसन) प्रेरित करने से चूहों में पुनर्जनन में मदद मिली, लेकिन मनुष्यों में यह खतरनाक होगा। AAV इंसर्ट (जैसे इंसर्शनल म्यूटाजेनेसिस) के दीर्घकालिक प्रभाव कम होते हैं, लेकिन किसी भी ओकुलर जीन थेरेपी को सावधानीपूर्वक मूल्यांकन की आवश्यकता होती है। संक्षेप में, प्रत्येक वृद्धि-प्रमोटिंग जीन को संभावित नुकसान के खिलाफ संतुलित किया जाना चाहिए: आदर्श रूप से क्षणिक रूप से या सख्त नियंत्रण में वितरित किया जाना चाहिए।

जीन वितरण रणनीतियाँ

जीनों को सही कोशिकाओं में पहुँचाना एक महत्वपूर्ण चुनौती है। RGCs के लिए, एडेनो-एसोसिएटेड वायरस (AAVs) कार्यवाहक वेक्टर हैं। AAVs सुरक्षित, गैर-प्रतिकृति करने वाले वायरस हैं जो चिकित्सीय जीनों को रेटिनल कोशिकाओं में ले जा सकते हैं। एक सामान्य तरीका इंट्राविट्रियल इंजेक्शन है: AAV को सीधे आंख के विट्रियस जेल में इंजेक्ट करना। AAV2 रेटिनल ट्रांसडक्शन के लिए क्लासिक सीरोटाइप है; यह इंट्राविट्रियल रूप से इंजेक्ट किए जाने पर RGCs तक कुशलता से पहुँचता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। वास्तव में, एक अध्ययन में पाया गया कि इंट्राविट्रियल AAV2 ने 90% से अधिक RGCs को ट्रांसड्यूस किया (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। अन्य कैप्सिड्स का भी उपयोग किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, इंट्राविट्रियल रूप से दिया गया AAV6 आंतरिक रेटिना और RGC परत के लिए बहुत अधिक ट्रॉपिज़्म दिखाता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। वैज्ञानिक AAV2 वेरिएंट (जैसे म्यूटेशन या चिमेरा) को भी इंजीनियर करते हैं ताकि रेटिनल बाधाओं को और भी बेहतर तरीके से पार किया जा सके, लेकिन वे विवरण विकसित हो रहे हैं।

एक और मार्ग सुप्राकोरोइडल इंजेक्शन है, जहाँ एक सुई या माइक्रोकैनुला स्क्लेरा और कोरोइड (संवहनी परत) के बीच AAV वितरित करता है। यह दृष्टिकोण रेटिना के नीचे वेक्टर को व्यापक रूप से फैलाता है। बंदरों में सुप्राकोरोइडल AAV8 के परिणामस्वरूप व्यापक जीन अभिव्यक्ति हुई (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। इसे विशेष रूप से डिज़ाइन की गई माइक्रोन्यूडल्स से किया जा सकता है। सुप्राकोरोइडल डिलीवरी बड़ी सर्जरी से बचती है लेकिन फिर भी आक्रामक है और स्थानीय सूजन का कारण बन सकती है। वास्तव में, सुप्राकोरोइडल AAV8 के कारण हल्का कोरोयोरेटिनाइटिस (कोरोइड की सूजन) हुआ जिसके लिए स्टेरॉयड की आवश्यकता थी, हालांकि यह हफ्तों में ठीक हो गया (pmc.ncbi.nlm.nih.gov) (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। महत्वपूर्ण रूप से, सुप्राकोरोइडल डिलीवरी ने इंट्राविट्रियल डिलीवरी की तुलना में AAV कैप्सिड के प्रति कमजोर प्रणालीगत एंटीबॉडी प्रतिक्रियाओं को प्रेरित किया (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। ऐसा इसलिए होने की संभावना है क्योंकि कुछ वायरस आंख से अलग तरीके से बच निकलते हैं। कुल मिलाकर, सुप्राकोरोइडल इंजेक्शन आंख के पिछले हिस्से में जीन थेरेपी के लिए आशाजनक लगता है, लेकिन इसके प्रतिरक्षा प्रभावों का प्रबंधन करने की आवश्यकता है।

प्रतिरक्षाजन्यता

भले ही आंख कुछ हद तक “प्रतिरक्षा-विशेषाधिकार प्राप्त” है, फिर भी AAV जीन डिलीवरी प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को उत्तेजित कर सकती है। इंट्राविट्रियल AAV अक्सर जल निकासी चैनलों के माध्यम से आंख से बाहर निकल जाता है। प्राइमेट्स में एक अध्ययन में पाया गया कि सबरेटिनल इंजेक्शन की तुलना में इंट्राविट्रियल AAV के परिणामस्वरूप रक्तप्रवाह में ~400-500 गुना अधिक वायरस होता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। इससे AAV कैप्सिड के खिलाफ एक बहुत मजबूत एंटीबॉडी प्रतिक्रिया हुई (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। इसके विपरीत, सबरेटिनल AAV (रेटिना के नीचे इंजेक्ट किया गया) आंख में अलग हो जाता है और आमतौर पर लगभग कोई एंटी-कैप्सिड एंटीबॉडी उत्पन्न नहीं करता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। सुप्राकोरोइडल AAV बीच में स्थित है: कुछ वायरस आंख में रहते हैं जबकि कुछ आस-पास के ऊतकों तक पहुँचते हैं। अध्ययनों से पता चलता है कि सुप्राकोरोइडल AAV इंट्राविट्रियल की तुलना में हल्के एंटी-कैप्सिड एंटीबॉडी उत्पादन का कारण बनता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov), लेकिन यह जीन उत्पाद के खिलाफ प्रतिरक्षा कोशिकाओं को उत्तेजित कर सकता है (जैसा कि GFP के साथ देखा गया है) क्योंकि यह रक्त-रेटिनल बाधा के बाहर कोशिकाओं को ट्रांसड्यूस करता है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)।

एंटीबॉडी के अलावा, टी-सेल प्रतिक्रियाएं ट्रांसड्यूस की गई कोशिकाओं पर हमला कर सकती हैं। यदि डाला गया जीन एक प्रोटीन पैदा करता है जिसे शरीर विदेशी मानता है (जैसे प्रयोगों में GFP), तो प्रतिरक्षा कोशिकाएं उन कोशिकाओं को साफ कर सकती हैं। यहां तक कि वास्तविक मानव जीन भी कभी-कभी निम्न-स्तर की सूजन को ट्रिगर कर सकते हैं। नैदानिक रेटिनल जीन परीक्षण (उदाहरण के लिए RPE65 के लिए) अक्सर इस प्रतिक्रिया को कम करने के लिए स्टेरॉयड देते हैं। जो मार्ग रेटिना के भीतर रहते हैं (सबरेटिनल, सुप्राकोरोइडल) वे विट्रियस इंजेक्शन की तुलना में कुल मिलाकर कम प्रतिरक्षाजनक होते हैं (pmc.ncbi.nlm.nih.gov) (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। भविष्य की उपचार पद्धतियों को कुशल वितरण को न्यूनतम प्रतिरक्षा सक्रियण के साथ संतुलित करने की आवश्यकता होगी, संभवतः नए AAV प्रकारों या प्रतिरक्षा-दमनकारी रेजिमेंस का उपयोग करके।

ग्लूकोमा में अनुवाद

ग्लूकोमा तीव्र तंत्रिका क्रश की तुलना में एक अलग चुनौती प्रस्तुत करता है। ग्लूकोमा में, उच्च नेत्र दबाव, कम रक्त प्रवाह और तनाव जैसे कारकों के कारण RGCs धीरे-धीरे मर जाते हैं। ग्लूकोमा का इलाज करने के लिए, जीन थेरेपी को दीर्घकालिक चोट की सेटिंग में काम करना चाहिए। इसका मतलब है कि समय महत्वपूर्ण है: RGCs की रक्षा के लिए उपचार जल्दी दिए जाने की आवश्यकता हो सकती है, या वृद्धि संकेतों को फिर से समायोजित करने के लिए समय-समय पर दिए जाने की आवश्यकता हो सकती है। सौभाग्य से, कुछ काम इस अंतर को पाटना शुरू कर रहे हैं। हाल के एक अध्ययन में, शोधकर्ताओं ने ग्लूकोमा-मॉडल चूहों की आंखों में हमेशा-ऑन TrkB रिसेप्टर (F-iTrkB) वितरित करने के लिए AAV का उपयोग किया। इन चूहों ने RGCs की सुरक्षा और पर्याप्त एक्सॉन पुनर्जनन दोनों दिखाए (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। यह बताता है कि ग्लूकोमा की स्थितियों में भी, विकास मार्गों को सक्रिय करने से मदद मिल सकती है।

फिर भी, क्रश मॉडल से मानव ग्लूकोमा की ओर बढ़ने के लिए और अधिक कदमों की आवश्यकता होगी। हमें इन जीन थेरेपी को केवल क्रश में ही नहीं, बल्कि पशु ग्लूकोमा मॉडल (जैसे प्रेरित ओकुलर हाइपरटेंशन या आनुवंशिक मॉडल) में परीक्षण करने की आवश्यकता है। हमें उम्र बढ़ने और रोगग्रस्त वातावरण: पुराने न्यूरॉन्स, निशान ऊतक और बदलते नेत्र दबाव पर भी विचार करना चाहिए। जीन थेरेपी को मानक ग्लूकोमा देखभाल (दबाव कम करना, न्यूरोट्रॉफिक कारकों का उपयोग करना) के साथ जोड़ना और नियंत्रित जीन प्रणालियों का उपयोग करना आवश्यक होगा। उदाहरण के लिए, जैसा कि उल्लेख किया गया है, AAV कंस्ट्रक्ट इंड्यूसिबल प्रमोटरों का उपयोग कर सकते हैं ताकि एक्सॉन के फिर से विकसित होने के बाद वृद्धि कारक जीन को बंद किया जा सके (pmc.ncbi.nlm.nih.gov) (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। क्योंकि मानव ग्लूकोमा धीरे-धीरे बढ़ता है, एक ही जीन इंजेक्शन पर्याप्त नहीं हो सकता है; बार-बार खुराक या लंबे समय तक चलने वाले वैक्टर की आवश्यकता हो सकती है। संक्षेप में, इन निष्कर्षों को ग्लूकोमा थेरेपी में अनुवाद करने का मतलब होगा दीर्घकालिक चोट की गतिशीलता के लिए समायोजन करना और यह सुनिश्चित करना कि उपचार सुरक्षित और टिकाऊ हों।

निष्कर्ष

जीन थेरेपी जो RGC के आंतरिक मार्गों को नियंत्रित करती है, रोमांचक क्षमता दिखाती है: कृंतकों में यह ऑप्टिक तंत्रिका को फिर से बढ़ा सकती है और कुछ दृष्टि को भी बहाल कर सकती है। PTEN/mTOR सक्रियण, KLF4 विलोपन, या Sox11 अति-अभिव्यक्ति जैसी प्रमुख रणनीतियाँ प्रत्येक विभिन्न कोशिका कार्यक्रमों के माध्यम से पुनर्जनन को बढ़ावा देती हैं। चूहे के अध्ययन इस बात की पुष्टि करते हैं कि एक्सॉन मस्तिष्क को फिर से संक्रमित कर सकते हैं और सरल दृश्य कार्यों में सुधार कर सकते हैं (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। हालांकि, सुरक्षा संबंधी मुद्दों (ऑन्कोजेनिक जोखिम, कोशिका हानि, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया) को हल किया जाना चाहिए, और वितरण विधियों को परिष्कृत किया जाना चाहिए। AAV वैक्टर और ओकुलर इंजेक्शन में प्रगति RGCs को कुशलता से लक्षित करने के उपकरण प्रदान करती है (pmc.ncbi.nlm.nih.gov) (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)। अगले चरणों में क्रोनिक ग्लूकोमा मॉडल में परीक्षण करना, खुराक और प्रमोटरों का अनुकूलन करना, और जीन थेरेपी को ग्लूकोमा उपचारों के साथ जोड़ना शामिल है। कुल मिलाकर, प्रीक्लिनिकल साक्ष्य आगे के विकास का दृढ़ता से समर्थन करते हैं: आंतरिक विकास मार्गों को सावधानीपूर्वक ट्यून करके, हम ऑप्टिक तंत्रिका की मरम्मत के लिए दृष्टिकोण को मौलिक रूप से बदल सकते हैं।